|
登陆查看更多优秀资源帖,与同道便捷交流讨论
您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册
x
Cytoskeleton(Rac1 GST 标签蛋白:显性负性)主要用途:
1、Rac1 GEF 结合研究
2、体外抑制 Rac GEF
3、通过显微注射在体内抑制 Rac 蛋白
Cytoskeleton(Rac1 GST 标签蛋白:显性负性)材料:
Rac1 蛋白的显性阴性形式在残基 17 处包含苏氨酸到天冬酰胺的取代。该突变体的通用名称是 Rac1(T17N)(或 N17Rac1)。天冬酰胺取代消除了蛋白质对 GTP 的亲和力并降低了其对 GDP 的亲和力。因此,Rac1(T17N) 总是处于无核苷酸状态或处于非活动状态,GDP 绑定状态。因此,它与 Rac GEF 紧密结合,并阻止野生型 Rac 被这些 GEF 激活。
人类 Rac1 蛋白的显性失活形式已在细菌系统中表达,并可作为 GST 标记的融合蛋白使用。重组蛋白为 50 kDa,由 Rac1 蛋白 (22 kDa) 和 28 kDa GST 标签组成。标签位于蛋白质的氨基末端。蛋白质以冻干粉形式提供。当它在蒸馏水中复溶至 1 mg/ml 时,蛋白质在以下缓冲液中:2 mM Tris pH 7.6、0.5 mM MgCl 2、0.5% 蔗糖、0.1% 葡聚糖。蛋白质浓度由 Precision Red Advanced Protein Assay Reagent (Cat # ADV02 ) 测定。
Cytoskeleton(Rac1 GST 标签蛋白:显性负性)纯度:
纯度是通过 SDS-PAGE 凝胶上的蛋白质扫描密度测定法确定的。样品 > 90% purae,28 kDa 的主要污染物是 GST 蛋白。
图 1: GST-Rac1(T17N) 纯度测定。10 g C17G01 在 SDS-PAGE 凝胶上电泳并用考马斯亮蓝染色
Cytoskeleton Rac1(T17N) 的生物活性
活性通过该蛋白 在体外 GEF 试验 (Cat # BK100 ) 中抑制野生型 Rac1 的 GEF 活化的能力来验证。
资料来源/艾美捷科技
|
|