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科普:Abnova TEV蛋白酶重组蛋白科学原理

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 楼主| 发表于 2022-5-13 16:12:28 | 显示全部楼层 |阅读模式

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Abnova TEV蛋白酶重组蛋白(2038 a.a.-2279 a.a.)是在大肠杆菌中表达的带有His标签的部分重组蛋白。本篇文章主要讲解Abnova TEV蛋白酶重组蛋白的科学背景以及相关参数。

艾美捷Abnova TEV蛋白酶重组蛋白科学背景:
Abnova TEV蛋白酶重组蛋是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯化的制剂,该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。和因子Xa、凝血酶相比,TEV酶是识别序列更加严格。
作为生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶,(Abnova)TEV酶识别非常一致的7氨基酸序列:E-Xaa-Xaa-Y-Xaa-Q-P1’(G/S),酶切发生在Q和P1’之间的肽键。最常用的7氨基酸序列是ENLYFQG。PChemicalbook1’位置可以是不同的小分子氨基酸,这样目标蛋白从融合蛋白的N端释放,带自然的N末端或者只多一个氨基酸的蛋白。艾美捷Abnova TEV蛋白酶重组蛋白是经过了基因工程改造的蛋白酶,稳定性好,在广泛的温度范围具有特异性。Abnova TEV蛋白酶重组蛋白来源于重组大肠杆菌,经过高度纯化,比活性达到10,000U/mg。最适酶切温度是30℃,但在4℃也具有酶活性。rTEV-H带His标签,酶切后可方便地通过Ni亲和柱层析去除。酶切的条件比如:温度、pH、DTT等可根据具体蛋白进行优化。
艾美捷Abnova TEV蛋白酶重组蛋白参数科普:
理论分子量(kDa):28.6
形态:液体
制备方法:大肠杆菌表达系统
纯度:经SDS-PAGE检测>95%
活动:具体的活动是≥ 10μg/mg。
质控检测:考马斯蓝SDS-PAGE染色
TEV的SDS-PAGE(4-20%):Lane 1: 3 ug;Lane 2: 5 ug;Lane 3: 8 ug
储存缓冲液:在0.1 M Tris-HCl、0.5 M NaCl、5 mM DTT和0.5 mM EDTA中,pH 8.0(20%甘油)
储存说明(Abnova):在-80°C下储存12个月,避免反复冻融。
以上就是对艾美捷Abnova TEV蛋白酶重组蛋白科学原理的相关介绍。

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