细胞增殖检测的2种方法，Abbkine解决增殖检测结果的非标准化问题

BLZJ_97df7a

本篇文章主要对细胞增殖检测的方法进行讲解，其中Abbkine细胞增殖检测（KTD103-CN）能解决增殖检测结果的非标准化问题。

目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法：

一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。例如：Ki67细胞增殖检测；BrdU细胞增殖检测；EdU细胞增殖检测。

另一种是间接的方法，即细胞活力检测方法，通过检测样品中健康细胞数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测方法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。例如：MTT法、CCK8试剂盒法。

MTT比色法：

是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

CCK8试剂盒法：

CCK-8试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。CCK-8的原理跟MTT其实是相同的，不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。

Ki67细胞增殖检测：

Ki-67抗体识别同名蛋白，在细胞周期 S期、G2期和M期表达，而在G0期和G1期(非增殖期)不表达。用针对Ki-67蛋白的单抗就可以检测细胞的增殖情况。

Brdu细胞增殖检测：

Brdu为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体，ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。

但由于抗体分子量大，难于掺入并被有效检测，因此BrdU检测需采用DNA酶或HCl或加热使DNA变性。对于植物细胞等有细胞壁的分析，采用抗体检测还需要消化细胞壁，细胞壁消化酶常含有一些杂质，会导致检测的可靠性降低，同时BrdU检测则需要进行长时间的孵育--几个小时甚至过夜。

EdU细胞增殖检测：

EdU（5-Ethynyl-2’- deoxyuridine）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU染料只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。

abbkine细胞增殖检测鸡尾酒套装（KTD103-CN）既能直接从 DNA 水平精准检测细胞增殖状态，同时又可以通过细胞代谢水平实现高通量检测细胞增殖状态。该套装包含经专利设计的细胞毒性阳性对照品，可完美解决目前增殖检测结果的非标准化问题，是一款通用型细胞增殖检测产品。

abbkine细胞增殖检测的两点优势：

结果标准化
—提供了细胞毒性阳性对照，可完美解决目前增殖/毒性检测结果的非标准化问题。
通用型
—可最直接准确地检测细胞增殖状态，也可选择高通量检测，覆盖了绝大多数细胞增殖/毒性检测的需求。

以上就是关于细胞增殖检测的几种方法，希望能对大家有所帮助。