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环氧化物酶(cyclooxygenase,cox)又称前列腺素类过氧化物合成酶, 是催化花生四烯酸转化为前列腺素类物质的限速酶。今天我们以艾美捷COX荧光抑制剂筛选试剂盒举例说明,谈谈环氧化酶(COX)荧光抑制剂筛选试剂盒对于肿瘤防治的重要作用。
1、COX荧光抑制剂筛选试剂盒原理
cox有两种同工酶cox-1和cox-2.cox-1是呈结构性表达;cox-2在大多数组织中呈诱导性表达, 并能被多种胞外刺激所诱导表达, 如脂多糖(LPS)、炎症细胞因子、内毒素、 肿瘤促进剂、一氧化氮等,受刺激后诱导表达成为炎症过程中重要的诱导酶。因此,cox-2是炎症治疗与癌痛治疗的重要靶点.cox抑制剂能有效缓解炎症, 且cox-2抑制剂塞来昔布(Celecoxib)和罗非昔布(Rofecoxib)有较低的毒副作用 , 故在临床上广泛使用。
2、艾美捷COX荧光抑制剂筛选试剂盒实验注意事项:
所有孔中的分析最终体积为200l。
在分析中使用稀释的分析缓冲液。
所有试剂(酶除外)须平衡至室温在开始化验之前。
无需一次性使用板上的所有孔。
不必同时使用这两种酶。可以使用COX-1或COX-2进行研究。
建议化验样品一式三份,但用户可自行决定。
可对30个抑制剂样品进行一式三份或四十六份的分析。
在室温下进行分析。
用530-540 nm的激发波长和585-595 nm的发射波长监测荧光。
在靠近荧光计的位置启动花生四烯酸反应,因为有必要在反应开始两分钟后读取平板。 |
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