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核糖核酸酶 A是内切核糖核酸酶,可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端,切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。作为知名的酶类供应商,本篇文章我们将以艾美捷科技Worthington核糖核酸酶 A为例,对核糖核酸酶 A进行相关科普。
艾美捷Worthington核糖核酸酶 A来源:牛胰腺
胰腺核糖核酸酶 (RNase I) 催化核苷酸的 5'-核糖与连接到相邻嘧啶核苷酸的 3'-核糖上(Worthington)的磷酸基团之间的磷酸二酯键断裂,形成 2',3'-环状磷酸水解成相应的3'-磷酸核苷。核糖核酸酶 A 的分子量为 13,700 道尔顿。它在 7.0-7.5 的最佳 pH 范围内运行。
核糖核酸酶 B 的分子量为 14,700 ± 300 道尔顿。它是一种糖蛋白,其氨基酸组成与 RNase A 无法区分。(Worthington)它每分子含有 6 个甘露糖残基和 2 个 N-乙酰氨基葡萄糖残基。它是 RNase A 的糖基化衍生物。
核糖核酸酶受重金属离子抑制,并受 DNA 竞争性抑制(Worthington)。由于分子生物学级 RNase A(产品代码:RPDF)基本上不含 DNase 和蛋白酶活性,因此该产品可用于在核酸工作中从 DNA 中去除 RNA,以及使用其他酶或必须回收完整蛋白质的地方。
艾美捷Worthington核糖核酸酶 A稳定性/储存: 分子生物学级产品(产品代码:RPDF)在 2-8°C 或 -20°C 下至少稳定 2 年。其他等级的 RNase A 和 RNase B 在 2-8°C 下可稳定 2-3 年。R、RB 和 RAF:储存在 2-8°C 并防止受潮。产品代码:RASE:储存在 -20°C 以保持单体形式。产品代码:RPDF:储存在 2-8°C 或 -20°C。
艾美捷Worthington核糖核酸酶 A单位定义:当酵母核糖体 RNA 水解为酸溶性寡核苷酸时,一个 Kalnitsky 单位在 37°C 和 pH 5.0 时在 260nm 处导致吸光度增加 1.0。1 个 Kunitz 单位等于 50 个 Worthington 单位。
艾美捷Worthington核糖核酸酶 A技术说明: 由于酶对玻璃表面具有亲和力,因此应特别注意处理酶(Worthington)。该酶保持活性,但在冻干后和在 ≥2°C 的低离子强度溶液中会聚集。使 DNase 失活的 RNase A 加热溶液可能不令人满意,因为如果发生沉淀形成,RNase 活性可能会丧失,并且热处理的 DNase 可能会随着时间的推移重新激活。(Worthington)产品代码:RPDF 适用于需要最低 DNase 和蛋白酶水平且无需进一步处理的应用。(Worthington)产品代码:RAF 在某些应用中无需处理即可使用。要热处理 RAF,请使用 10mM 醋酸盐 pH 5.0,含或不含 15mM CaCl 2在 100°C 下 15 分钟或在 80°C 下更长。如果在中性 pH 下加热,产品可能会沉淀。产品编号热处理:RASE会因磷酸盐的存在而沉淀产品。
看完对Worthington核糖核酸酶 A的上述说明,你是否对核糖核酸酶 A有了更加深入的了解呢? |
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