FISH检测在血液肿瘤分子诊断中的全面应用方案

海鸥

                                                                                                                                                                            血液肿瘤的病理诊断涉及到多学科技术，多平台的联合应用。除了非常重要和基础的形态学诊断之外，还有流式细胞学，分子生物学及细胞遗传学。而细胞遗传学是目前血液病理的诊断中的地位可谓是重中之重，且对临床诊断价值巨大。
荧光原位杂交（FISH）作为和细胞遗传学的另外一个“金标准”-核型分析（kayrotyping）的平行技术平台，普及日渐广泛。随着血液疾病细胞遗传学检测NCCN指南（2014版）的发布和实践，今天我们将FISH检测在血液肿瘤（包括淋巴瘤）诊断中常用的应用做一个系统性的整理和梳理，供大家参考学习：

急性髓细胞白血病（AML）
FISH探针	检测异常类型
临床意义：FISH检测进行分型诊断，区分急性早幼粒细胞白血病（APL），有较好的细胞遗传学风险，有较好与预后，分子异常类型主要有：t(16;16),inv(16)，t(15;17)，t(8;21)(q21.3;q22)
Vysis LSI CBFB Dual Color, Break Apart Rearrangement Probe	t(16;16),inv(16)
Vysis LSI PML/RARA Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(15;17)
Vysis RUNX/RUNX1T1 DF FISH Probe Kit	t(8;21)(q21.3;q22)
伴费城染色体，t(9;22)的AML病人的治疗建议如同急变期髓性白血病治疗，加以络氨酸激酶抑制剂，属于中级细胞遗传学风险：
Vysis LSI BCR/ABL Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(9;22)
高风险的细胞遗产学：存在复杂的分子异常类型（超过3种异常）：-5，5q-，-7，  7q-，除t(9;11)以外的11q23重排，3号倒位，t(3;3)
MDS套组探针	-5，5q-，-7，  7q-
Vysis RPN1/MECOM DF FISH Probe Kit	t(3;3)(q21.3;q26.2)
急性淋巴细胞白血病(ALL)
诊断，分型，风险评估，低风险：超二倍体（51-66条染色体）；三倍体染色体4,10,17有最好预后；t(12;21)
Vysis ETV6/RUNX1 DF FISH Probe Kit	t(12;21)
细胞遗传学高风险：亚二倍体（＜44条染色体），t(9;22)[BCR-ABL]，t(v;11q23)[MLL重排]
Vysis LSI MLL Dual Color, Break Apart Rearrangement Probe	t(v;11q23)
Vysis LSI BCR/ABL Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(9;22)
Vysis LSI BCR/ABL ES Dual Color	t(9;22)
诊断，分型
LSI TCF3/PBX1 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(1:19)(q23;p13)
慢性髓细胞白血病（CML）
辅助诊断CML，鉴别诊断，BCR/ABL  融合基因可由主要断裂点和次要断裂点两种断裂方式形成。主要断裂见于95%的CML患者中，有助于确诊CML；指导格列卫使用。
Vysis LSI BCR/ABL Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(9;22)
Vysis LSI BCR/ABL ES Dual Color	t(9;22)
慢性淋巴细胞白血病（CLL）
鉴别诊断，预后风险评估，指导治疗
Vysis LSI p53/LSI ATM and LSI  D13S319/LSI 13q34/CEP 12 Multi-color Probe	del(17q13),
	del(11q22.3) and
	del(13q14),
	del(13q34),+12
预后良好：只有13q-
Vysis LSI D13S319 (13q14.3) SpectrumOrange/ LSI 13q34  SpectrumGreen Probe	del(13q14)
中性预后：+12和正常
CEP 12 SpectrumOrange Fluorescent DNA Probe Kit (without control  slides) FDA	+12
预后不良：17p-(p53)和11q-(ATM)，虽然17p-的存在对氟达拉宾，烷化剂和利妥昔单抗的耐药有相关性，但是已经有报道指出阿伦单抗对于17p-的患者的活性
Vysis TP53 / CEP 17 FISH Probe Kit	del(17p13)
Vysis ATM / CEP 11 FISH Probe Kit	del(11q22.3)
多发性骨髓瘤（MM）
预后良好：t(11;14)
Vysis IGH/CCND1 DF FISH Probe Kit	t(11;14)
预后不良：t(4;14)，t(14;16)，17p13缺失，13号染色体缺失，1号染色体扩增增加了MM进展的风险
Vysis LSI IGH/FGFR3 Dual Color, Dual Fusion Translocation Probe	t(4;14)
Vysis IGH/MAF DF FISH Probe Kit	t(14;16)
Vysis LSI TP53 (17p13.1) SpectrumOrange Probe	del(17p13)
Vysis LSI D13S319 (13q14.3) SpectrumOrange/ LSI 13q34  SpectrumGreen Probe	del(13q14)
Vysis LSI MCL1 SpectrumGold Probe	1q21  Amplification
骨髓异常增生综合症（MDS）
FISH探针组合预后评估包括：     预后好：只有一个-Y，只有del(5q)，只有del(20q)     预后差：存在复杂的分子异常类型（超过3种异常），或7号染色体异常
Vysis CSF1R/D5S23, D5S721 FISH Probe Kit	-5/del(5q33-q34)
Vysis LSI EGR1/D5S23, D5S721 Dual Color Probe	-5/del(5q31)
Vysis D7S486/CEP 7 FISH Probe Kit	-7/del(7q31)
Vysis D7S522/CEP 7 FISH Probe Kit	-7/del(7q31)
Vysis D20S108 FISH Probe Kit	del(20q)
CEP X SpectrumOrange / CEP Y SpectrumGreen DNA Probe Kit	-Y
滤泡性淋巴瘤
诊断：BCL2重排或t(14;18),BCL6重排     组织学转化为DLBCL病理评估：FISH检测BCL2重排t(14;18),MYC重排t(8;14)或者其它变异t(8;22),t(2;8)
LSI BCL2 breakapart 分离探针	t(14;18)
IGH/MYC/CEP8 三色分离探针	t(8;14)  及+8
LSI BCL6 breakapart 分离探针	t(3q27)
胃MALT淋巴瘤
诊断：在特定情况下有用:t(1;14),t(14;18),t(3;14),t(11;14),t(11;18)。如果IHC  Cyclin D1阳性，没有必要检测t(11;18)
LSI BIRC3/MALT1 DF 双融合探针	t(11;18)
LSI MALT1 breakapart分离探针	t(11;18)
IGH/MALT1	t(14;18)
非胃MALT淋巴瘤
诊断：在某些情况下有用     细胞遗传学/FISH检测t(11;18),t(11;14),t(3;14),t(14;18)
LSI BIRC3/MALT1 DF 双融合探针	t(11;18)
LSI MALT1 breakapart分离探针	t(11;18)
LSI IGH/CCND1 DF双融合探针	t(11;14)
LSI IGH/CCND1 XT	t(11;14)
LSI BCL2 BAP分离探针	t(14;18)
IGH/BCL2 DC DF双色双融合	t(14;18)
IGH/MALT1	t(14;18)
弥漫性大B细胞淋巴瘤
诊断：在某些情况下有用：     FISH检测 t(14;18),BCL2, t(8;14),MYC,t(3;v)t(8;v)
LSI BCL2 BAP分离探针	t(14;18)
IGH/BCL2 DC DF双色双融合	t(14;18)
IGH/MALT1	t(14;18)
IGH/MYC/CEP8 三色分离探针	t(8;14)  及+8
CEP8	+8
LSI BCL6分离探针	t(3;v)
Burkitts淋巴瘤
诊断：必不可少     FISH检测t(8;14)或相关的MYC变种     某种情况下有用：BCL2，BCL6重排
IGH/MYC/CEP8 三色分离探针	t(8;14)  及+8
CEP8	+8
IGH  breakaprt分离探针	IgH
MYC breakaprt分离探针	MYC
LSI BCL2 breakapart分离探针	BCL2
IGH/BCL2 DC DF双色双融合	BCL2
LSI BCL6 breakaprt分离探针	BCL6
淋巴母细胞淋巴瘤
诊断—— 必不可少：     FISH检测MYC基因，t(9;22),t(8;14)极其变种
MYC breakaprt分离探针	MYC
LSI BCR/ABL三色双融合	t(9;22)
IGH/MYC/CEP8 三色分离探针	t(8;14)
CEP8	+8
艾滋相关的B细胞淋巴瘤
诊断——在某些情况下有用：     FISH检测BCL2，BCL6，MYC基因
LSI BCL2 BAP分离探针	t(14;18)
IGH/BCL2 DC DF双色双融合	t(14;18)
LSI BCL6 breakaprt分离探针	BCL6
MYC breakaprt分离探针	MYC
原发性皮肤B细胞淋巴瘤
诊断——在某些情况下有用：     FISH检测t(14;18)
LSI BCL2 BAP分离探针	t(14;18)
IGH/BCL2 DC DF双色双融合	t(14;18)
IGH/MALT1	t(14;18)

绿绣芙蓉

这种方法在血液病理学的地位举足轻重。但是一般的医院染色体核型分析做的不多。有时一个复杂核型可以提示诊断。谢谢楼主

飞鸟

谢谢老师分享