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[分享学习] 胸腹水细胞沉渣石蜡切片技术的应用

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发表于 2017-3-27 14:19:53 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式

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来源:临床与实验病理学杂志
作者:杨小苗,申成香,司有谊,怀建国(安徽省芜湖市第一人民医院)

石蜡切片 切片处理步骤 细胞沉渣切片
  送检胸腹水标本通常处理方法是离心后涂片,95%乙醇固定染色后显微镜下阅片。在实际工作中发现该方法制出的切片镜下观察细胞不集中,且数量不多,如果发现可疑细胞,诊断医师则需冒很大风险去诊断该病。因此,我们把细胞沉渣石蜡切片及免疫组化技术应用于胸腹水的制片中,经过反复实验,发现送检胸腹水离心后,将沉淀物再处理,然后常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色后,细胞明显增多且集中,大大提高阳性诊断率,也提高诊断医师的阅片速度。

  普通细胞涂片制作 送检胸腹水静置30min,弃上清液,留取底层液体25~50ml(视标本的情况而定,若送检胸腹水过于澄清,为保证细胞量足够,可全取),放入离心管,2500r/min离心10min,离心后用吸管吸掉上清液,取沉淀物上层细胞,滴于载玻片并涂片,待玻片中间部分稍干后放入95%乙醇内固定10~15min,常规HE染色。

  细胞沉渣切片制作 送检胸腹水静置30min,弃上清液,留取底层液体25~50ml(视标本的情况而定,若送检胸腹水过于澄清,为保证细胞量足够,可全取),放入离心管,2500r/min离心10min,离心后用吸管吸掉上清液,向含沉淀物的离心管内加入10%中性福尔马林20ml,放入振荡仪,1200r/min振荡10min,2500r/min离心10min,倒去上清液用镊子取出沉淀物,用擦镜纸包好,常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色。

  血性标本前处理 如果送检胸腹水中含血性成分较多时,则需对离心管内沉淀物进行清洗,以此去除红细胞,减少无关细胞的干扰。此时可加入冰醋酸与乙醇混合液20ml(25%乙醇95ml,冰醋酸5ml),混合后再离心,加入10%中性福尔马林固定、振荡离心等步骤。

  细胞量较少的标本制作 如果送检胸腹水离心处理后发现细胞量较少,则可以利用蛋清液作为支架法制作细胞蜡块。标本离心沉淀后倒去上清液,向离心管中加入蛋清液1ml,尽量将底部细胞悬浮于蛋清中,2500r/min离心10min,去除多余蛋清,加入10%中性福尔马林2ml,轻轻摇动离心管,固定30min即可取出沉淀物,用擦镜纸包好,常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色。
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发表于 2017-9-10 11:25:00 | 显示全部楼层
简单易行的方法。学习了
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发表于 2017-9-30 00:21:21 | 显示全部楼层
谢谢分享
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发表于 2017-10-30 23:13:48 | 显示全部楼层
按照此方法做了,效果很好,谢谢分享。
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发表于 2018-1-26 16:43:51 来自手机 | 显示全部楼层
细胞蜡块的制备,中性福尔马林与95%的乙醇,哪个更好?
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