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科普:Cy3标记链霉亲和素是什么?使用时有哪些注意事项?

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 楼主| 发表于 2022-5-6 16:05:27 | 显示全部楼层 |阅读模式

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Cy3标记链霉亲和素是一种从Streptomyces avidinii中分离出来的细菌蛋白,其结合生物素的能力与蛋清亲和素相似,并且由于其更有利的化学性质而被用作蛋清亲和素的替代品。本篇文章将对艾美捷Cy3标记链霉亲和素的用法进行详细说明,方便读者更加了解到Cy3标记链霉亲和素是什么。
注意:建议将链霉亲和素偶联物与生物素-SP偶联抗体和生物素-SP 偶联 ChromPure 蛋白结合使用。

Jackson艾美捷Cy3标记链霉亲和素用法:
物理状态:冻干固体

储存和再水化:将冻干的固体储存在 2-8°C。用指定体积的 dH2O 再水化,如果不清楚则离心。在使用当天准备工作稀释液。产品在 2-8°C 下可稳定保存约 6 周,为未稀释液体。
再水化后延长储存:分装并在 -70°C 或以下冷冻。避免反复冻融。或者,添加等体积的甘油(ACS 级或更好),使最终浓度达到 50%,并在 -20°C 下以液体形式储存。
有效期:从补液之日起一年。如果测试结果对预期用途是可接受的,则有效期可能会延长。
缓冲液: 0.01M 磷酸钠,0.25M NaCl,pH 7.6
稳定剂: 15 mg/ml 牛血清白蛋白(不含 IgG,不含蛋白酶)
防腐剂: 0.05% 叠氮化钠

建议工作浓度或稀释范围:
Western Blot:- 0.5- 2 g / ml
Histo-/Cyto-Chemistry:- 0.5-2 g / ml

稀释因子以范围的形式呈现,因为最佳稀释度是许多因素的函数,例如抗原密度、渗透性等。实际使用的稀释度必须根据经验确定。
Jackson艾美捷Cy3标记链霉亲和素共轭:
花青 Cy3
Amax: 550 Emax: 570nm
与其他橙红色荧光染料偶联物相比,Cy3 更亮、更耐光且背景更少。Cy3 偶联物可在 550 nm 处最大激发,在 570 nm 处具有峰值发射。对于荧光显微镜,Cy3 可以使用传统的四甲基罗丹明 (TRITC) 滤光片组进行可视化,因为激发和发射光谱几乎与 TRITC 相同。我们推荐 Cy3 作为 TRITC 的更明亮的替代品。Cy3 可以用氩激光(514 nm 或 528 nm 线)激发至最大值的约 50%,或用氦/氖激光(543 nm 线)或汞灯(546 nm 线)激发至最大值的约 75%。Cy3 已与荧光素一起用于双标记;但是,建议对荧光素使用窄带通发射滤光片,以尽量减少 FITC 滤光片组中的 Cy3 荧光。Cy3 还可以与 Alexa Fluor 647 配对使用共聚焦显微镜进行多重标记。然而,多重标记的更好选择是罗丹明 Red-X,因为它的荧光介于绿色荧光染料(如 Alexa Fluor 488)和远红色荧光染料(如 Alexa Fluor 647)之间。
以上就是对Cy3标记链霉亲和素的相关科普,现在你对它更了解了吗?
资料来源/艾美捷科技
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